1.把BI放在预先测定过的灭菌位置，比如低气流量或者气流分布薄弱的区域，包括墙体角落的内部和周边以及使用的一次性实验材料的中间。注意:接有菌种一面的包装上印有标签，因此，灭菌循环时应该把印有标签的一面朝外。验证时通常需要在不同位点放置多个BI。进行灭菌循环。
2.灭菌完成后，取出BI于实验室做无菌试验，需一个或多个未暴露的BI作阳性对照。暴露的BI应尽快从灭菌设备中取出来培养。
培养说明：
1.在层流罩中培养。始终按照严格的无菌操作流程。至少无菌手套是必须的。视设备和环境情况而定，还包括帽子，面具及实验服。
2.用无菌剪刀剪开或者剥开Tyvek包装纸。
3.用无菌镊子夹出载体并放置于含有大豆酪蛋白消化培养基(SCDM)或胰蛋白大豆肉汤(TSB)中培养或者MesaReleasat培养基(PM100)的试管中。
4.无菌培养阳性对照载体。
5.选择一个或多个相同的培养基做阴性对照。
6.55-60°培养测试管和对照管7天，每日观察生长情况(浑浊)。
判读结果说明：
1.测试管 浑浊代表灭菌不成功，至少有一个孢子存活；不浑浊代表灭菌成功，没有存活的孢子。
2.阳性对照 浑浊代表存在有活力孢子，能够在培养基中生长；不浑浊代表载体上不存在有活力的微生物，或者培养基中可能含有抑制测试微生物生长的成分。请联系上海纪革森。
3.阴性对照 浑浊代表培养基中可能存在其他微生物，请联系上海纪革森；不浑浊代表培养基中没有微生物存在。
